新型中华绒螯蟹呼肠孤病毒RT-LAMP检测开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

课题意义中华绒螯蟹俗称河蟹、大闸蟹,分类学上隶属于甲壳动物十足目,方蟹科,弓腿蟹亚科,绒螯蟹属。

中华绒螯蟹是我国淡水养殖的主要品种之一,从1994年在江苏省首次发现患颤抖病死亡的病蟹以来,此病迅速蔓延至全国,迄今为止,在江苏、浙江、江西、上海、湖北、安徽及辽宁盘锦等地相继暴发此病,造成了约十亿元以上的经济损失。

尽管颤抖病已经已经被发现20余年，但病原体仍未得到确认。

2. 研究的基本内容和问题

本研究的目的是开发一个rt-lamp快速检测宿主生物体的绒螯蟹呼肠孤病毒。

一种检更简单，更方便，成本更低，速度比rt-pcr更快而且不需要复杂的设备的检测方法。

rt-lamp检测方法使用了四个种类的识别靶dna的六个不同的序列特异性引物。

3. 研究的方法与方案

1.样本采集选自中国江苏省渔场的健康中华绒螯蟹，将纯化呼肠孤病毒（50微升），腹腔注射于健康蟹（n =10）的步足基部。

对照组（n =10）注入生理盐水（50微升）。

人工感染螃蟹于水族箱中培养，喂养和正常管理。

4. 研究创新点

一种全新的快速的检测方法，具有较高的特异性、敏感性、快捷等特性，而且成本低廉，所需设备并不复杂，便于应用推广。

5. 研究计划与进展

（1）2015.07-2015.08 查阅资料，拟定实验方案。

（2）2015.08-2015.10 进行正式实验。

（3）2015.10-2016.03 进行实验数据的整理、分析。